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DETECCIÓN MOLECULAR DIFERENCIAL DEL VIRUS DE LA FIEBRE AMARILLA DE ORIGEN VACUNAL Y SALVAJE MEDIANTE RT-PCR EN TIEMPO REAL.

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Title: DETECCIÓN MOLECULAR DIFERENCIAL DEL VIRUS DE LA FIEBRE AMARILLA DE ORIGEN VACUNAL Y SALVAJE MEDIANTE RT-PCR EN TIEMPO REAL.
Authors: Gabriel, De Lucio1, Marcelo, Adolfo1, Cabezas, César2, Romero, Klissman1, Figueroa, Dana1, Ayuque, Gabriela1, Merino, Susy1, Caico, Jackelyn1, Camargo, Elizabeth1, Chavarria, Viviana1, Tiburcio, Zarela1, García, María Paquita1
Source: Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud Pública. 2025 Supplement, Vol. 42, pS19-S19. 1p.
Subjects: YELLOW fever, REVERSE transcriptase polymerase chain reaction, MOLECULAR diagnosis, PUBLIC health, PANDEMIC preparedness, IMMUNIZATION, DIFFERENTIAL diagnosis
Geographic Terms: PERU
Abstract (English): The article focuses on the differential molecular detection of the yellow fever virus (YFV) of vaccine and wild origin using a real-time RT-PCR assay. In Peru, 55 confirmed cases of yellow fever have been reported, with high lethality in severe forms. The study standardizes and validates a method that successfully differentiates between the 17D vaccine virus and the wild virus with a sensitivity and specificity of 100%, which is crucial for differential diagnosis, especially in cases of adverse events following vaccination. This advancement could be fundamental in the context of outbreaks and for improving public health response. [Extracted from the article]
Abstract (Spanish): Introducción. El virus de la fiebre amarilla (YFV), sigue siendo endémico en regiones tropicales. En el Perú hasta la SE 44-25 se han registrado 55 casos confirmados con 18 defunciones; con una letalidad del 30 % en sus formas graves. La vacuna 17D (YFV-17D) es uno de los inmunógenos más seguros y eficaces. Sin embargo, en raras ocasiones genera eventos adversos viscerotrópicos o neurotrópicos clínicamente indistinguibles de la infección por YFV-salvaje. Objetivos. Estandarizar y validar un ensayo de RT-PCR en tiempo real capaz de diferenciar el virus de la fiebre amarilla de origen vacunal y salvaje en muestras clínicas humanas. Metodología. Se seleccionaron 5 sueros positivos a YFV-salvaje, 1 cepa salvaje, 3 cepas vacunales YFV-17D, 5 controles negativos (3 sueros Dengue serotipos 1-3 y 2 sueros negativos a YFV). El ARN se extrajo con el kit CWBIO a partir de 200 µL de muestra y se eluyó en 60 µL. Los ARN de cepas se analizaron en diluciones de 1:10 y 1:100; los ARN séricos se usaron sin diluir. Todas las muestras se procesaron empleando 10 μl de ARN, con temperatura de hibridación de 64 °C y cebadores y sondas específicos para linajes vacunal y salvaje. Resultados. Todas las cepas vacunales y salvajes fueron detectadas correctamente hasta la dilución 1:100. Los 5 sueros YFV-salvajes positivos amplificaron únicamente con la sonda específica, mientras que los 5 controles negativos (Dengue 1, 2, 3 + 2 sueros negativos a YFV) no mostraron amplificación en ninguna sonda, alcanzando sensibilidad y especificidad del 100 %. Conclusiones. El ensayo RT-PCR en tiempo real discrimina con 100 % de sensibilidad y 100 % de especificidad el virus vacunal 17D de los linajes salvajes, incluso en diluciones 1:100 y será útil para el diagnóstico diferencial sobre todo en cuadros de ESAVI con o sin escenarios de brote. [ABSTRACT FROM AUTHOR]
Copyright of Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud Pública is the property of Instituto Nacional de Salud (Peru) and its content may not be copied or emailed to multiple sites without the copyright holder's express written permission. Additionally, content may not be used with any artificial intelligence tools or machine learning technologies. However, users may print, download, or email articles for individual use. This abstract may be abridged. No warranty is given about the accuracy of the copy. Users should refer to the original published version of the material for the full abstract. (Copyright applies to all Abstracts.)
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