DETECCIÓN MOLECULAR DIFERENCIAL DEL VIRUS DE LA FIEBRE AMARILLA DE ORIGEN VACUNAL Y SALVAJE MEDIANTE RT-PCR EN TIEMPO REAL.

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Title:	DETECCIÓN MOLECULAR DIFERENCIAL DEL VIRUS DE LA FIEBRE AMARILLA DE ORIGEN VACUNAL Y SALVAJE MEDIANTE RT-PCR EN TIEMPO REAL.
Authors:	Gabriel, De Lucio¹, Marcelo, Adolfo¹, Cabezas, César², Romero, Klissman¹, Figueroa, Dana¹, Ayuque, Gabriela¹, Merino, Susy¹, Caico, Jackelyn¹, Camargo, Elizabeth¹, Chavarria, Viviana¹, Tiburcio, Zarela¹, García, María Paquita¹
Source:	Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud Pública. 2025 Supplement, Vol. 42, pS19-S19. 1p.
Subjects:	YELLOW fever, REVERSE transcriptase polymerase chain reaction, MOLECULAR diagnosis, PUBLIC health, PANDEMIC preparedness, IMMUNIZATION, DIFFERENTIAL diagnosis
Geographic Terms:	PERU
Abstract (English):	The article focuses on the differential molecular detection of the yellow fever virus (YFV) of vaccine and wild origin using a real-time RT-PCR assay. In Peru, 55 confirmed cases of yellow fever have been reported, with high lethality in severe forms. The study standardizes and validates a method that successfully differentiates between the 17D vaccine virus and the wild virus with a sensitivity and specificity of 100%, which is crucial for differential diagnosis, especially in cases of adverse events following vaccination. This advancement could be fundamental in the context of outbreaks and for improving public health response. [Extracted from the article]
Abstract (Spanish):	Introducción. El virus de la fiebre amarilla (YFV), sigue siendo endémico en regiones tropicales. En el Perú hasta la SE 44-25 se han registrado 55 casos confirmados con 18 defunciones; con una letalidad del 30 % en sus formas graves. La vacuna 17D (YFV-17D) es uno de los inmunógenos más seguros y eficaces. Sin embargo, en raras ocasiones genera eventos adversos viscerotrópicos o neurotrópicos clínicamente indistinguibles de la infección por YFV-salvaje. Objetivos. Estandarizar y validar un ensayo de RT-PCR en tiempo real capaz de diferenciar el virus de la fiebre amarilla de origen vacunal y salvaje en muestras clínicas humanas. Metodología. Se seleccionaron 5 sueros positivos a YFV-salvaje, 1 cepa salvaje, 3 cepas vacunales YFV-17D, 5 controles negativos (3 sueros Dengue serotipos 1-3 y 2 sueros negativos a YFV). El ARN se extrajo con el kit CWBIO a partir de 200 µL de muestra y se eluyó en 60 µL. Los ARN de cepas se analizaron en diluciones de 1:10 y 1:100; los ARN séricos se usaron sin diluir. Todas las muestras se procesaron empleando 10 μl de ARN, con temperatura de hibridación de 64 °C y cebadores y sondas específicos para linajes vacunal y salvaje. Resultados. Todas las cepas vacunales y salvajes fueron detectadas correctamente hasta la dilución 1:100. Los 5 sueros YFV-salvajes positivos amplificaron únicamente con la sonda específica, mientras que los 5 controles negativos (Dengue 1, 2, 3 + 2 sueros negativos a YFV) no mostraron amplificación en ninguna sonda, alcanzando sensibilidad y especificidad del 100 %. Conclusiones. El ensayo RT-PCR en tiempo real discrimina con 100 % de sensibilidad y 100 % de especificidad el virus vacunal 17D de los linajes salvajes, incluso en diluciones 1:100 y será útil para el diagnóstico diferencial sobre todo en cuadros de ESAVI con o sin escenarios de brote. [ABSTRACT FROM AUTHOR]
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Database:	MedicLatina

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